欧美第三页,年轻的母亲2 韩国,亚洲国产中文字幕在线视频综合,BGMBGMBGM老妇视频

您好!歡迎訪問和元李記(上海)生物技術(shù)有限公司網(wǎng)站!
咨詢熱線

18616108315

當(dāng)前位置:首頁(yè) > 技術(shù)文章 > 活性氧ROS檢測(cè)原理及檢測(cè)步驟

活性氧ROS檢測(cè)原理及檢測(cè)步驟

更新時(shí)間:2024-08-09      點(diǎn)擊次數(shù):1313

ROS也叫活性氧(reactive oxygen species)是細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生的一種具有氧化活性的化學(xué)物質(zhì),包括過氧化氫、超氧陰離子等。ROS在正常生理?xiàng)l件下也會(huì)產(chǎn)生,但當(dāng)其產(chǎn)生過多或清除不足時(shí),會(huì)對(duì)細(xì)胞造成氧化應(yīng)激,導(dǎo)致細(xì)胞損傷和疾病發(fā)生。

檢測(cè)原理

用于檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)ROS廣泛采用的方法是DCFH-DA熒光探針法。DCFH-DA(二氯熒光黃雙乙酸鹽)是一種可指示的探針,其本身不具有熒光,但可以自由穿過細(xì)胞膜。一旦進(jìn)入細(xì)胞,它會(huì)被細(xì)胞內(nèi)的酯酶水解成DCFH。由于DCFH無(wú)法穿過細(xì)胞膜,因此熒光探針會(huì)在細(xì)胞內(nèi)積聚。細(xì)胞內(nèi)的ROS能夠氧化無(wú)熒光的DCFH,生成有熒光的DCF,且熒光強(qiáng)度與ROS水平成正比。通過熒光顯微鏡、流式細(xì)胞儀或激光共聚焦顯微鏡等設(shè)備,在最大激發(fā)波長(zhǎng)480nm和最大發(fā)射波長(zhǎng)525nm下檢測(cè)熒光

檢測(cè)步驟

一、裝載探針

刺激時(shí)間較短(通常為2 h以內(nèi))的細(xì)胞:先裝載探針,后用活性氧陽(yáng)性對(duì)照或自己感興趣的藥物刺激細(xì)胞。

刺激時(shí)間較長(zhǎng)(通常為6 h以上)的細(xì)胞:先用活性氧陽(yáng)性對(duì)照或自己感興趣的藥物刺激細(xì)胞,后裝載探針。

1、原位裝載探針(僅適用于貼壁細(xì)胞)

活性氧ROS檢測(cè)原理及檢測(cè)步驟

2、收集細(xì)胞后裝載探針(適用于貼壁細(xì)胞和懸浮細(xì)胞)

活性氧ROS檢測(cè)原理及檢測(cè)步驟

二、檢測(cè)

原位裝載探針法:激光共聚焦顯微鏡直接觀察,或收集細(xì)胞后用熒光分光光度計(jì)、熒光酶標(biāo)儀或流式細(xì)胞儀檢測(cè)。

收集細(xì)胞后裝載探針:用熒光分光光度計(jì)、熒光酶標(biāo)儀或流式細(xì)胞儀檢測(cè),也可以用激光共聚焦顯微鏡直接觀察。

注意事項(xiàng)

① 探針裝載后,一定要洗凈殘余的未進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的探針,否則會(huì)導(dǎo)致背景較高。

② 探針裝載完畢并洗凈殘余探針后,可以進(jìn)行激發(fā)波長(zhǎng)的掃描和發(fā)射波長(zhǎng)的掃描,以確認(rèn)探針的裝載情況是否

良好。

③ 盡量縮短探針裝載后到測(cè)定所用的時(shí)間(刺激時(shí)間除外),以減少各種可能的誤差。

④ 根據(jù)結(jié)果顯示的整體熒光強(qiáng)度的高低,可以適當(dāng)調(diào)整DCFH-DA探針的稀釋倍數(shù)以及孵育時(shí)間。


微信咨詢
地址:上海市浦東新區(qū)紫萍路908弄 傳真:021-50724961
©2025 和元李記(上海)生物技術(shù)有限公司 版權(quán)所有 All Rights Reserved.  備案號(hào):滬ICP備2023007219號(hào)-1
国产欧美亚洲精品a第一页| 精品国产亚洲一区二区三区| 色偷偷888欧美精品久久久| 亚洲中文无码AV永久不收费| 亚洲日韩美女视频国产丝袜| 成人免费无码视频在线网站| 无码人妻丰满熟妇区BBBBXXXX| 春闺密事无删减版电影在线观看| 亚洲另类久久久精品| 波多野42部无码喷潮在线| 成人影视夜夜添狠狠添| 色老头在线一区二区三区| 欧美日韩二级片| 色综合色综合久久综合频道| 波多野42部无码喷潮在线| 人妻玉臀翘起迎合巨龙| 亚洲欧美丝袜制服在线| 久久国产乱子伦精品免费乳及| 最新中文字幕av专区 | 体验区试看120秒啪啪免费| 无码不卡AV东京热毛片| 性生活久久久久久久| 欧美伊人久久综合成人网| 成人午夜av网站| CHINESE国产AVVIDEOXXXX实拍| 色视频无码专区在线观看| 日韩精品三级视频| 日韩经典第一页| 大学生野战视频| 日韩中文高清在线| 天天躁日日躁狠狠躁| 色哟哟国产精品免费观看| 校长在办公室疯狂侵犯校花| 人人妻人人澡人人爽| 日韩精品一区二区三区视频| 91精品国产蜜臀在线观看| 亚洲VA成无码人在线观看天堂| 人人人爽人人爽人人AV| 日本SM/羞辱/调教/捆绑视频| 欧美日韩精品免费一区二区三区| 解开警花的裙子猛烈进入|